利用正交设计优化脑膜炎奈瑟氏菌Taqman-MGB探针检测反应体系

• 作者: 刘衡川 叶运莉 杨艳 汪川 苏红卫
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 脑膜炎奈瑟氏菌 Taqman-MGB探针 正交设计 实时PCR 条件优化
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 1541-1544
• 页数: 4页
• 分类号: R373.3+1
• 字数: 2157字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-8507.2008.08.060

摘要

[目的]建立Taqman-MGB探针检测脑膜炎奈瑟氏菌的最佳反应体系,探讨影响Taqman-MGB探针检测的多个因素.[方法]利用正交设计,从Buffer、 Taq DNA聚合酶、引物、Mg2+、探针、dNTP 6种因素对实时荧光PCR体系进行优化,在此基础上,进一步细调,寻求实时荧光PCR反应的最佳反应体系.[结果]正交试验结果表明,最佳反应体系为(50μl): Mg2+ 7.0mmol/L,引物0.6μmol/L, dNTP 300μmol/L, Taq DNA聚合酶2.0U,探针0.1μmol/L, Buffer 1.5×.[结论]Md2+是影响实时荧光PCR的重要因素;所得体系反应稳定,正交法实验设计高效、快捷,科学性强,值得推广.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘衡川	四川大学公共卫生学院医学检验教研室	132	945	15.0	22.0
2	杨艳	四川大学公共卫生学院医学检验教研室	57	306	11.0	15.0
4	叶运莉	泸州医学院公共卫生系	97	572	11.0	19.0
7	苏红卫	泸州医学院公共卫生系	39	254	8.0	14.0
8	汪川	四川大学公共卫生学院医学检验教研室	32	178	9.0	12.0