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摘要:
目的 构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,并观察其在肝癌细胞HepG2中的表达和抗肿瘤作用.方法 应用PCR技术扩增DCN全长基因eDNA片段,与pcDNA3.1载体连接,并转化到大肠杆菌中扩增获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体,脂质体介导转染HepG2,经G418筛选建立稳定转染细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达.MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期.结果 RT-PCR可见转染组细胞mRNA表达明显增多,免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高.细胞生长曲线显示转染组细胞生长缓慢,G,期细胞显著增多.结论 本方法可成功建立稳定转染DCN的HepG:细胞株,并证实DCN能够抑制HepG:细胞株的生长.
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逆转录聚合酶链反应
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文献信息
篇名 核心蛋白聚糖在HepG2细胞中的表达及作用
来源期刊 山东医药 学科 医学
关键词 核心蛋白聚糖 聚合酶链反应 转染 HepG2
年,卷(期) 2008,(7) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 30-32
页数 3页 分类号 R735.7
字数 2054字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.07.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张桂珍 109 466 11.0 16.0
2 吕俊峰 13 88 5.0 9.0
6 张玉成 30 116 6.0 9.0
7 杜珍武 59 140 6.0 8.0
8 高申 61 317 11.0 15.0
9 王雅丽 19 75 5.0 8.0
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研究主题发展历程
节点文献
核心蛋白聚糖
聚合酶链反应
转染
HepG2
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
山东医药
周刊
1002-266X
37-1156/R
大16开
济南市燕东新路6号
24-8
1957
chi
出版文献量(篇)
55362
总下载数(次)
42
总被引数(次)
199298
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