牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立

• 作者: 冯挺财 张乃生 杨正涛 胡珩 邵谱
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛乳铁蛋白 cELISA 定量检测
• 年，卷（期）: 2008,（18）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 7650-7652,7761
• 页数: 4页
• 分类号: S823.8
• 字数: 3478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.18.072

摘要

[目的]建立一种检测牛乳铁蛋白(LF)含量的竞争ELISA检测方法.[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体,采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价,建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法.[结果]纯化后,制备的鼠抗牛LF单抗效价达1∶1 280 000,且鉴定为IgG1.该单抗对牛乳铁蛋白具有很强的特异性.制备酶标单抗的效价为1∶640 000.抗原包被物和酶标单抗的最适工作浓度分别为1.0 μg/ml和 1∶40 000.抗原用碳酸盐缓冲液(pH值为9.6)包被先在4℃过夜、再37℃放置2 h的效果最好.采用2%牛血清白蛋白作为封闭剂的效果最好.在31.25～1 000 ng/ml浓度范围内,牛乳铁蛋白的logit (B/B0)与牛乳铁蛋白浓度的对数值呈显著的线性关系,其回归方程为 y=-1.8991x+5.043 3(R2=0.9873).[结论]该研究为研制用于奶牛乳腺炎诊断的牛LF检测试剂盒奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨正涛	吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室	55	247	8.0	13.0
2	张乃生	吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室	140	842	16.0	23.0
3	邵谱	吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室	5	15	2.0	3.0
4	冯挺财	吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室	1	12	1.0	1.0
5	胡珩	吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室	2	19	2.0	2.0