淀粉酶链霉菌BAC基因组文库的构建及鉴定

• 作者: 侯松涛 张贝贝 朱国萍 王宝娟 王波 葛亚东
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 淀粉酶链霉菌 基因组 细菌人工染色体(BAC)文库
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3651字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2009.02.004

摘要

提取淀粉酶链霉菌SM33基因组DNA,用Hind III部分酶解后回收40 kb～60 kb大小的高分子量DNA,与质粒载体pIndigoBAC536连接,电击转化EPI300感受态细胞,经蓝白斑筛选共挑取了5 184个白色克隆.从文库中随机挑选10个克隆,酶切检测平均插入片段约为50 kb,覆盖了32.4倍基因组.并且插入片段均具有9～15个Not I酶切位点,符合链霉菌基因组特征.通过对BAC文库的筛选,获得苹果酸脱氢酶基因(mdh)的保守序列,与已知的链霉菌mdh具有很高的相似性.淀粉酶链霉菌BAC基因组文库的建立,对基因克隆、基因组物理图谱、次级代谢途径、新抗生素的发现以及工业用酶的应用等研究均有重要意义.