JC病毒VLP-Z的制备及其生物活性鉴定

• 作者: 屈秋民 折潇 翟海燕
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: JC病毒 病毒样颗粒 基因治疗 定向基因传递
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 1114-1117
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2009.12.017

摘要

目的 利用先期重组的原核表达质粒pET15b-VP1-Z体外表达重组的蛋白VP1-Z;研究VP1-Z是否组装成VLP-Z,以及VLP-z是否具有与野生型VLP相同的生物学活性.方法 重组质粒pET15b-VP1-Z转染大肠杆菌BL21(DB),IPTG诱导重组蛋白VP1-Z表达;按照野生型VLP的制备方法纯化蛋白;Western blot和考马斯亮蓝染色确定纯化蛋白及其纯度;电镜观察VLP-Z是否形成病毒样颗粒;血凝抑制试验检测VLP-Z是否具有血凝抑制活性;细胞免疫荧光检测VLP-Z能否转运进入细胞.结果 超速离心法得到纯度及浓度较高的重组蛋白VLP-Z,其相对分子质量约50×10~3;电镜观察发现VLP-Z组装成病毒样颗粒,直径约45～50 nm,较野生型VLP直径稍大;血凝抑制试验证实VLP-Z可以抑制人"O"型红细胞聚集;细胞免疫荧光显示,感染后VLP-Z可以转运进入HeLa细胞质及细胞核,与野生型VLP感染后相同.结论 成功制备了VLP-Z,且VLP-Z具有与野生型VLP相同的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	屈秋民	西安交通大学医学院第一附属医院神经内科	107	549	12.0	18.0
2	折潇	西安交通大学医学院第一附属医院神经内科	3	4	1.0	1.0
3	翟海燕		6	26	3.0	5.0