膜结合型干细胞因子促进白血病细胞K562的增殖和集落形成

• 作者: 吴克复 林永敏 王大刚 种靖慧 郑国光 马翠花
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膜结合型干细胞因子 C-kit 白血病 并置性作用
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: R733.7|R392.1
• 字数: 3763字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2009.01.003

摘要

目的: 探讨膜结合型干细胞因子(membrane-bound stem cell factor,m-SCF)在白血病细胞中的作用.方法:克隆并构建携可溶型干细胞因子(soluble stem cell factor,s-SCF)前体的真核表达质粒pTARGET-s,采用Overlap PCR法去除外显子6序列,进一步构建m-SCF的表达质粒pTARGET-m,DNA测序鉴定.通过脂质体介导分别将上述载体和空载体pTARGET转染白血病K562细胞,用G418筛选稳定表达细胞株,并用RT-PCR、Western blotting法鉴定.通过CCK-8细胞增殖实验以及集落形成实验观察不同细胞株体外增殖特点.结果:成功构建了s-SCF和m-SCF的真核表达载体,获得了稳定转染细胞株K562-V、K562-S、K562-M.U底培养条件下,K562-M增殖能力明显高于K562-V和K562-S(均P<0.01).K562-M集落形成率显著高于K562-V 和K562-S (均P<0.01),且集落形态大于其他两种细胞.结论:m-SCF与C-kit之间的并置性作用显著促进白血病细胞的增殖.