Mfn2基因shRNA质粒的构建及其流体力学转染技术的实验研究

• 作者: 徐焱成 蔡小莉 陈小琳 雷幼蓉
• 来源期刊: 生物医学工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 线粒体融合素基因2 shRNA 质粒 流体力学注射法 RNA干扰 实验研究
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 112-115
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 3059字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6278.2009.02.007

摘要

构建线粒体融合素基因2(Mfn2)短发卡RNA(Mfn2shRNA)表达质粒,观察流体力学注射法对绿色荧光蛋白器官靶向性.根据Mfn2基因序列,挑选1条目标基因序列和1条非特异性基因序列,构建质粒重组体并测序及鉴定.将24只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、阴性对照组和转染组(n=8),阴性对照组和转染组分别通过尾静脉快速注入阴性对照质粒(HK)和Mfn2shRNA质粒溶液1.5 ml.24 h后采集肝脏、心脏、肌肉、肾脏组织冰冻切片,荧光显微镜下观察,并取血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)浓度.结果表明:质粒HK和Mfn2shRNA构建成功;流体力学注射后,肝脏、心肌及肾脏可见绿色荧光蛋白的表达;与正常对照组比较,阴性对照组血清ALT、AST有明显差异,转染组血清ALT、AST较正常对照组及阴性对照组明显升高.Mfn2shRNA质粒载体的成功构建,流体力学肝脏靶向性的基因转染方法,为活体内研究Mfn2功能提供了可靠的材料和方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐焱成	武汉大学中南医院内分泌科	175	951	13.0	25.0
2	陈小琳	武汉大学人民医院内分泌科	22	115	6.0	9.0
3	雷幼蓉	武汉大学人民医院内分泌科	11	33	3.0	5.0
4	蔡小莉	武汉大学人民医院内分泌科	1	2	1.0	1.0