鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的融合表达及兔抗血清的制备

• 作者: 孙芬芬 宇文延青 王笑梅 祁小乐 高宏雷 高玉龙 高立
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2 融合表达 兔抗血清
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: S858.321.65|Q75
• 字数: 3374字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.04.003

摘要

以鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)Gt株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP2基因,经EcoR Ⅰ/Sal Ⅰ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的pET30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及序列鉴定正确的阳性重组子转化E. coli DE3菌,经IPTG诱导,表达的VP2蛋白通过Ni-NTA树脂纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗血清,并对其进行间接ELISA、IFA和Western blot分析.SDS-PAGE分析表明,在IVFG诱导下成功表达了约为50 kDa的His-VP2融合蛋白;间接ELISA检测制备的兔抗血清效价在1:25 600以上;IFA及Western-blot分析结果表明,其可特异性结合真核表达的VP2蛋白以及IBDV全病毒.研究结果提示,免抗VP2血清可用于VP2蛋白及病毒的检测,为进一步研究IBDV分子生物学功能提供了物质基础.