隐孢子虫卵囊基因组的提取及以保守基因为靶标的PCR检测

• 作者: 刘超 尹静 李迎凯 王华然 王尚 王福玉
• 来源期刊: 解放军预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 隐孢子虫卵囊 基因组提取 18S rRNA基因 PCR
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R382.3
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨提高PCR检测微小隐孢子虫卵囊方法 的特异性和敏感性,为防止隐孢子虫病流行提供检测依据.方法 应用BALB/c小鼠感染扩增卵囊,不连续蔗糖密度梯度离心法从粪便中纯化卵囊,通过冻融和超声法破碎卵囊,然后以酚/氯仿/异戊醇法提取基因组DNA作为PCR扩增模板,根据隐孢子虫保守基因18S rRNA,设计一对特异性的引物,扩增约450 bp的目的 片段.结果 超声处理法对隐孢子虫卵囊的破囊率为92%,明显高于冻融法的86%.2个组抽提的DNA作为模板均扩增出目的 片段,但超声处理组敏感性高于冻融处理组,分别能检测到卵囊2个/mL和20个/mL.结论 超声法对微小隐孢子虫卵囊的破碎效果优于冻融法,经改进的PCR检测微小隐孢子虫卵囊方法 具有特异性好和敏感性强的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘超	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	24	191	8.0	13.0
2	尹静	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	38	366	12.0	18.0
3	王华然	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	12	82	5.0	9.0
4	王福玉	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	12	252	7.0	12.0
5	李迎凯	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	7	55	3.0	7.0
6	王尚	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	10	72	4.0	8.0