TSA处理供体细胞对组蛋白乙酰化和核重编程效果的影响

• 作者: 万敏 刘利杰 刘根胜 张东 张涌 杨鹭 王勇胜
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 核移植 曲古抑菌素A 重编程 激光共聚焦显微术
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1007-1012
• 页数: 6页
• 分类号: S823|S814.8
• 字数: 4191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.07.007

摘要

克隆胚胎基因组的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因.试验中以第5代牛胎儿成纤维细胞作为供体核,以牛卵母细胞作为受体胞质进行体细胞核移植,用75 nmol·L-1曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)分别处理供体细胞6、12和24 h,通过核移植检测克隆胚胎发育率,并应用激光共聚焦显微镜技术和流式细胞术检测处理细胞和克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平和细胞周期.结果显示:随着TSA处理时间的延长,供体细胞组蛋白H3K18乙酰化水平不断提高;以75 nmot·L-1TSA处理供体细胞12 h的克隆胚的囊胚发育率显著高于未处理组(23.5%vs 15.7 %,P<0.05);供体细胞经TSA处理的克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平与未处理组相比差异不显著(P>0.5);处理组和对照组细胞G0/G1期和S期比例间存在显著差异(P<0.05).结论:TSA对核供体细胞的处理存在时间效应,75 nmol·L-1TSA处理12 h的牛胎儿成纤维细胞更易被卵母细胞重编程,显著提高了克隆胚的体外发育能力,初步证实TSA是通过提高供体细胞组蛋白乙酰化水平来促进供体细胞重编程的.