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小鼠STAT4,STAT6基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定
小鼠STAT4,STAT6基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定
作者:
刘恩梅
杨琴
王莉佳
田代印
符州
黄英
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
哮喘
信号传导子及转录激活因子
RNA干扰
shRNA
质粒
摘要:
目的:构建并鉴定小鼠信号转导子和转录激活因子4(STAT4),信号转导子和转录激活因子6(STAT6)具有发夹结构小干扰RNA(shRNA)表达质粒.方法:根据STAT4和STAT6基因mRNA序列,在体外分别合成有小发夹结构的2条STAT4特异性寡核苷酸序列,2条STAT6特异性寡核苷酸序列,退火后与线性化pGenesil-3质粒连接,转化感受态细胞DH5α,扩增,纯化得到所需质粒.同时设计构建分别针对小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的干扰质粒作为阳性对照,不具有基因同源性的非特异性基因的质粒作为阴性对照序列.通过酶切后琼脂糖凝胶电泳和基因测鉴定纯化质粒分子量及插入片段的序列.结果:经限制性酶切和测序鉴定分析证实基因插入正确,与设计的序列完全相符.结论:成功构建了针对小鼠STAT4,STAT6基因的发夹结构小干扰RNA表达载体.为今后利用基因沉默技术从转录后水平抑制STAT4,STAT6的研究奠定基础.
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文献信息
篇名
小鼠STAT4,STAT6基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定
来源期刊
重庆医科大学学报
学科
医学
关键词
哮喘
信号传导子及转录激活因子
RNA干扰
shRNA
质粒
年,卷(期)
2009,(1)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
16-19
页数
4页
分类号
R563.3
字数
2213字
语种
中文
DOI
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作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
杨琴
重庆医科大学附属儿童医院呼吸科
88
389
11.0
14.0
2
黄英
重庆医科大学附属儿童医院呼吸科
153
1434
20.0
29.0
3
刘恩梅
重庆医科大学附属儿童医院呼吸科
195
2288
26.0
37.0
4
符州
重庆医科大学附属儿童医院呼吸科
160
1569
23.0
32.0
5
王莉佳
重庆医科大学附属儿童医院呼吸科
121
1299
18.0
30.0
6
田代印
重庆医科大学附属儿童医院呼吸科
24
130
7.0
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信号传导子及转录激活因子
RNA干扰
shRNA
质粒
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
重庆医科大学学报
主办单位:
重庆医科大学
出版周期:
月刊
ISSN:
0253-3626
CN:
50-1046/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市渝中区医学院路1号
邮发代号:
创刊时间:
1976
语种:
chi
出版文献量(篇)
7628
总下载数(次)
10
总被引数(次)
36778
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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