犬结核SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 丁铲 于圣青 刘佩红 周锦萍 王伟 王水明 陈鸿军
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 结核分技杆菌 IS1081 SYBR Green 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 细菌
• 页码范围: 55-59
• 页数: 5页
• 分类号: S858.292.52|Q78
• 字数: 3775字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.02.009

摘要

本研究基于IS1081基因建立了鉴定犬结核的SYBR Green荧光定量PCR方法.在最佳反应条件下反应效率为1.09,获得的标准曲线相关系数R值达0.999 5,标准曲线的线性范围达到1～1×107拷贝8个数量级,最低可检测到约10个目的拷贝,即31.4 fg DNA.根据溶解曲线分析,扩增产物中无引物二聚体的影响,说明所设计引物特异,退火温度合适.这表明本研究建立的SYBR Green荧光定量方法灵敏度高、定量范围广.利用该方法对临床样品进行检测,结果发现:与结核杆菌分离培养方法比较,符合率为85%.240份犬猫鼻拭子中150份被检测为阳性,这说明犬猫鼻腔中分枝杆菌携带率很高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	中国农业科学院上海兽医研究所	112	1494	21.0	35.0
2	丁铲	中国农业科学院上海兽医研究所	95	454	11.0	16.0
3	于圣青	中国农业科学院上海兽医研究所	53	286	9.0	14.0
4	刘佩红		69	286	9.0	12.0
5	周锦萍		89	317	10.0	13.0
6	陈鸿军	中国农业科学院上海兽医研究所	57	114	6.0	8.0
7	王水明		3	5	1.0	2.0