人白细胞介素33基因的克隆表达及其生物学活性的研究

• 作者: 姜艳芳 李玉斌 牛俊奇 王朝霞 辛桂杰
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素-33 克隆与表达 大肠杆菌 生物活性
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 164-166,170
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3636字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人白细胞介素33(human interleukin-33,hIL-33)基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株,并对纯化的蛋白进行生物活性的初步测定.方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术从人成纤维细胞总RNA中反转录并扩增得到人的成熟肽IL-33基因;采用基因克隆技术,构建PQE30-IL33重组质粒;采用Ni2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白;应用ELISA方法检测纯化蛋白诱导产生的IL-4和IL-5.结果:SDS-PAGE分析显示表达蛋白约占菌体总蛋白的25%,Western印迹法证实重组蛋白为特异性蛋白,纯化后纯度达到95%以上.表达的重组蛋白IL-33促进人外周血单个核细胞产生IL-4和IL-5,浓度分别达到(106±2.6)pg/ml和(1 220±10.4)pg/ml,而未刺激对照组的浓度只有(32.2±2.3)pg/ml和(67.3±2.5)pg/ml.结论:成功构建出hIL-33的原核表达载体,诱导产生蛋白能诱导IL-4和IL-5细胞因子的产生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛俊奇	吉林大学第一医院肝病科	189	1139	15.0	27.0
2	姜艳芳	吉林大学第一医院肝病科	59	187	6.0	10.0
3	辛桂杰	吉林大学第一医院肝病科	45	141	7.0	9.0
4	王朝霞	吉林大学第一医院肝病科	30	250	10.0	15.0