濒危植物峨眉野连ISSR反应体系的建立与优化

• 作者: 何平 张春平 胡世俊 高姗
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 峨眉野连 ISSR 建立 优化
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 系统与演化植物学
• 页码范围: 39-43
• 页数: 5页
• 分类号: Q943
• 字数: 2707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3142.2009.01.007

摘要

针对峨眉野连ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系,为进一步研究峨眉野连的种质资源遗传多样性奠定基础.通过筛选引物并设定影响峨眉野连ISSR-PCR反应诸因子的不同梯度,检测其不同反应体系的扩增效果,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立峨眉野连ISSR-PCR稳定可靠的反应体系.首次建立了可用于峨眉野连ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系:25μL PCR反应体系中,内含1×PCR Buffer,1.5 mmol/LMg2+,200 μmol/L dNTP,0.3 μmol/L引物,80 ng模板,1.0 U Taq DNA聚合酶.扩增程序为94 ℃预变性5 min,然后进行35个循环:94 ℃变性30 s,(据不同引物的退火温度)复性60 s,72 ℃延伸90 s,循环结束后72 ℃延伸7 min,4 ℃保存.所建立的峨眉野连ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,可以较好地应用于峨眉野连的种质资源多样性及居群鉴别的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张春平		4	43	4.0	4.0
2	何平		6	40	4.0	6.0
3	高姗		2	19	2.0	2.0
4	胡世俊	中国科学院昆明植物研究所	5	80	5.0	5.0