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RT-LAMP快速检测Norwalk病毒GⅡ型
RT-LAMP快速检测Norwalk病毒GⅡ型
作者:
宋克云
张如胜
杨秋林
欧新华
苏良
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
逆转录环介导等温扩增
Norwalk病毒GⅡ
RNA聚合酶
检测
摘要:
建立一种检测Norwalk病毒GⅡ型快速、敏感的一步逆转录环介导等温扩增(Reverse transcription-loop-me-diated isothermal amplification,RT-LAMP)方法.针对Norwalk病毒RNA聚合酶基冈特异性序列的6个区域设计4条LAMP引物,65℃保温约120 min,完成对Norwalk病毒GⅡ的扩增,扩增产物通过肉眼观察、SYBR GreenⅠ染色、凝胶电泳及酶切消化进行鉴定.利用RT-LAMP和RT-PCR方法同时检测48份Norwalk病毒GⅡ粪便标本和12份A组轮状病毒标本来验证RT-LAMP方法的特异性;将Norwalk病毒GⅠⅡ RNA一系列稀释后用RT-LAMP和RT-PCR方法进行检测来比较两者敏感性.46份Norwalk病毒GⅠⅡ粪便标本出现LAMP扩增反应:通过肉眼观察、SYBR Green Ⅰ染色和凝胶电泳均能观察到LAMP扩增产物的存在,LAMP产物的特异性通过酶切消化加以证实;2份Norwalk病毒GⅡ粪便标本和12份A组轮状病毒标本未出现RT-LAMP扩增.RT-LAMP与RT-PCR特异性符合率为100%,RT-LAMP和RT-PCR检测Norwalk病毒GⅡ的检测下限均为15.6pg/管.与RT-PCR相比较,一步RT-LAMP法检测粪便中Norwalk病毒GⅡ的方法是一种快速、敏感、特异且准确的方法,有望用于快速检测感染性腹泻暴发时粪便中的Norwalk病毒GⅡ.
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篇名
RT-LAMP快速检测Norwalk病毒GⅡ型
来源期刊
病毒学报
学科
医学
关键词
逆转录环介导等温扩增
Norwalk病毒GⅡ
RNA聚合酶
检测
年,卷(期)
2009,(4)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
291-295
页数
5页
分类号
R373.2
字数
语种
中文
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Norwalk病毒GⅡ
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病毒学报
主办单位:
中国微生物学会
出版周期:
双月刊
ISSN:
1000-8721
CN:
11-1865/R
开本:
大16开
出版地:
北京西城区迎新街100号
邮发代号:
82-227
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
2313
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18
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