成年大鼠嗅鞘细胞的分离培养及形态学研究

• 作者: 刘仲凯 宋哲 贺西京
• 来源期刊: 美中国际创伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嗅鞘细胞 细胞培养 细胞纯化
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨成年大鼠嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的分离培养和纯化方法,并观察其形态学变化及免疫组织学特性,为研究脊髓损伤后神经再牛获得丰富嗅鞘细胞来源奠定理论基础.方法:采用原代培养技术,从成年SD大鼠的嗅球分离培养嗅鞘细胞,用Nash差速贴壁法和阿糖胞苷抑制相结合的方法培养纯化,倒置相差显微镜下观察嗅鞘细胞的形态变化特点及其生长情况,并行神经生长因子受体(NGFRp75)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学染色鉴定以及纯度检测.结果:体外培养的成年大鼠嗅鞘细胞主要为双极或三极细胞,其突起细长.未经纯化则成纤维细胞生长迅速而占据优势,而纯化培养后的嗅鞘细胞纯度可达90%以上.免疫细胞化学染色显示,培养的嗅鞘细胞呈现NGFRp75和GFAP染色阳性.结论:成年大鼠嗅鞘细胞的原代培养中细胞纯化是必要且必须的:而在脊髓损伤修复的研究中,Nash差速贴壁法和化学药物法不失为一种简单、经济、实用的嗅鞘细胞纯化方法.