甜樱桃品种SSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 孔瑾 张文娜 张新忠 李天忠 王忆 许雪峰 韩振海
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 樱桃 SSR 反应体系
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 103-107
• 页数: 5页
• 分类号: S6
• 字数: 3694字
• 语种: 中文

摘要

以甜樱桃品种那翁为试材,研究了樱桃SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响,并比较了采用聚丙稀酰胺凝胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异.结果表明:在PCR反应体系中,DNA最适浓度30～45 ng;Mg~(2+)的最适浓度范围为1.5～3.0 mmol/L;dNTP最适浓度为0.2～0.3 mmol/L;引物的最适浓度为0.3～0.4 μmol/L;Taq聚合酶在20 μl反应体系中宜加入0.5 μl.利用此反应体系,对24份樱桃代表资源进行了SSR反应,用6%的非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测,扩增产物在100～250 bp之间,不同品种间DNA谱带多态性丰富.琼脂糖电泳检测的DNA多态性不如聚丙稀酰胺凝胶丰富.