HPV 18 L1病毒样颗粒的表达纯化及其豚鼠抗血清制备

• 作者: 张婷 彭清林 范东升 许于飞 许雪梅 谢喜秀 郑伟
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒18型 病毒样颗粒 杆状病毒表达系统 抗血清
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1039-1043
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9|Q786
• 字数: 2939字
• 语种: 中文

摘要

目的 优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV 18 L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清.方法 联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV 18 L1基因,合成后克隆入pFastBacl载体,构建重组病毒,感染sf9昆虫细胞72 h后进行Western blot表达鉴定,密度梯度离心法纯化后进行纯度鉴定及形态学鉴定,获得HPV 18 L1 VLP,联合弗氏佐剂免疫豚鼠制备抗血清.结果 HPV 18 L1优化基因在昆虫细胞中可有效表达,纯化的HPV 18 L1蛋白纯度达90%以上,电镜观察可见直径约为50 nln的VLP,豚鼠免疫血清中HPV 18 L1 VLP特异性抗体滴度达5.12×105.结论 HPV 18 L1优化基因可在昆虫细胞中高效表达并组装成VLP,制备的高滴度抗血清为HPV 18 L1 VLP疫苗的进一步研究打下基础.