重组甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白的纯化及其多克隆抗体制备

• 作者: 林剑伟 江克清 许莉萍 郭莺 阙友雄 陈如凯
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘蔗花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 纯化 多克隆抗体 组织印迹
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 69-71,102
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|Q503
• 字数: 3568字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.01.020

摘要

目的:制备可用于甘蔗花叶病毒(ScMV)E株系(ScMV-E)检测用多克隆抗体.方法:将ScMV-E外壳蛋白(CP)基因连接到pET29a(+)上,经PCR检测、酶切及测序鉴定获得重组质粒pET29a-CP,在大肠杆菌B121(DE3)中诱导表达重组ScMV-E外壳蛋白;采用His Trap Kit纯化目的蛋白,作为抗原免疫新西兰大白兔,制备特异性抗体;通过间接ELISA、Westem blot和组织印迹法检测所制备抗体的特异性.结果:SDS-PAGE分析表明.重组融合蛋白含6个组氨酸标记,相对分子质量约43 000;Westem blot检测显示所获得的抗体特异性良好,间接ELISA法测得血清的效价为1:81 920;甘蔗叶片的组织印迹检测结果显示杂交效果良好.结论:制备的多克隆抗体可直接用于ScMV-E检测,并有望用于制备ScMV-E检测试剂盒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈如凯		45	813	17.0	27.0
2	许莉萍		10	107	7.0	10.0
3	阙友雄		7	43	4.0	6.0
4	郭莺		3	11	2.0	3.0
5	林剑伟		3	17	3.0	3.0
6	江克清		2	10	2.0	2.0