5株不同亚型HIV-1毒株gp120序列特征分析及其蛋白的表达

• 作者: 刘思杨 庄道民 李敬云 李林 李韩平 王铮 鲍作义
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 gp120 糖基化蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 424-430
• 页数: 7页
• 分类号: R3
• 字数: 4405字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2009.05.010

摘要

目的 分析我国HIV-1主要亚型毒株的gp120区域的序列特征,并表达出gp120糖基化蛋白,为研究gp120的致病机制和设计疫苗奠定基础.方法 利用巢式PCR从来自于不同省份的5名HIV-1感染者外周血单个核细胞DNA中扩增全长gp120基因并测序,对序列特征进行分析,并将获得的gp120基因克隆入真核表达载体,体外表达获得gp120糖基化蛋白.结果 序列分析显示,此5条gp120序列分属HIV-1 Thai-B、BC重组和AE重组哑型,虽然亚型不同,但这些gp120序列在相同的位置都存在着一些保守的糖基化位点,且都具备相同的Furin蛋白酶第一切割位点,与参考序列比较发现,不同的HIV亚型序列中,除V3序列长度较为保守外,V1、V2、V4、V5各区域都有不同程度的缺失现象,与BC重组和AE重组亚型相比,Thai-B亚型V3的顶端环呈现出多种组合.最终将这5条gpl20序列都克隆人真核表达载体并表达出糖基化的gp120蛋白.结论 在设计疫苗和检测试剂时应考虑到膜区的高变性,gp120糖蛋白的体外表达有利于进一步开展针对我国主要HIV流行毒株膜蛋白致病机制和疫苗学的研究.