HPLC法测定CYP 3A4酶活性的研究

• 作者: 余爱荣 李维亮 李罄 熊磊 王乃平 苏明威 辛华雯
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CYP 3A 肝微粒体 咪达唑仑 1′-羟基咪达唑仑 高效液相色谱
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 53-56
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3165字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种快速、准确的以咪达唑仑作为"探针药物"评价或测定细胞色素酶(CYP3A4)酶活性的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)-紫外检测(UV detection,VWD)方法.方法 采用的色谱柱为依立特C18柱(4.6 mm×100 mm,5 μm),流速0.8 ml/min,紫外检测波长254 nm,柱温40 ℃.咪达唑仑(midazolam,MDZ)与大鼠肝微粒体温孵后,加入甲醇在低温下终止反应,再加入定量内标地西泮(diazepam,DZP),涡旋后高速离心,取上清液50 μl进样.结果 1′-羟基咪达唑仑(1-hydroxymidazolam,1′-OHMDZ)与内标DZP tR分别为7.02 min、10.51 min,峰形对称且分离充分(R>1.5),线性范围为15.6～780 ng·ml-1,最低定量限(lower limit of quantitation,LLOQ)为15.6 ng·ml-1,高中低浓度提取回收率为106.3%、102.5%和102.6%,待测物的日内、日间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于10%.肝微粒体Km=15 μmol·L-1,Vmax=0.081 59 nM·min-1·mg-1.结论 温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定.该方法快速、稳定、灵敏度高,适合体外DZP及其代谢产物1′-羟基咪达唑仑的测定,可用于体外CYP 3A酶活性测定或酶动力学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊磊	广州军区武汉总医院临床药理科	34	259	9.0	15.0
2	辛华雯	广州军区武汉总医院临床药理科	172	1264	17.0	24.0
3	李罄	广州军区武汉总医院临床药理科	100	804	16.0	21.0
4	余爱荣	广州军区武汉总医院临床药理科	115	994	17.0	24.0
5	王乃平		84	1132	18.0	31.0
6	苏明威	广州军区武汉总医院临床药理科	6	98	5.0	6.0
8	李维亮	广州军区武汉总医院临床药理科	22	163	7.0	12.0