适于双向电泳分析的苹果叶片蛋白质提取方法

• 作者: 张新忠 曾广娟 李春敏 滕云龙 董文轩
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 双向电泳 蛋白质提取方法 苹果叶片 蛋白质组学分析
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 484-488
• 页数: 5页
• 分类号: O658
• 字数: 3571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.021

摘要

为了探索适用于双向电泳(2-DE)分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法.以7 cm、pH 3～10的线性固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)胶条作为第一向电泳,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)(12.5%的分离胶)作为第二向电泳,对提取物进行2-DE分离,采用银染显色.结果表明,上述4种方法在2-DE图谱上分别得到140,215,181和616个蛋白质点.其中以改良的Tris-HCl提取法得到的蛋白质点数最多,且背景清晰、图谱上没有明显的横纵条纹.为了进一步验证改良的Tris-HCl提取法的有效性,用18 cm、pH 3～10的线性IPG胶条和12.5%的分离胶对提取的苹果叶片蛋白质进行2-DE分离,考马斯亮蓝R-250染色,共检测到455个蛋白质点,其相对分子质量主要分布在 14 000～66 000 范围内,图谱背景清晰,再次证明应用该方法制备的样品适用于双向电泳分析,可用于苹果叶片的蛋白质组学分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张新忠	中国农业大学园艺植物研究所	65	627	17.0	22.0
2	滕云龙	沈阳农业大学园艺学院	2	50	2.0	2.0
3	董文轩	沈阳农业大学园艺学院	65	464	12.0	19.0