DNA测序与线性反向探针杂交法检测HBV P基因耐药突变的比较

• 作者: 姜丽丽 张野 王平忠 白雪帆 连建奇 黄长形
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢性乙型肝炎 乙型肝炎病毒 核苷/酸类药物 耐药性突变 DNA序列测定 线性反向探针杂交
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 179-183,213
• 页数: 6页
• 分类号: R5
• 字数: 4226字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2009.03.006

摘要

目的 建立和优化扩增慢性乙型肝炎患者血清HBV P基因的PCR方法,比较DNA测序法与线性反向探针杂交法检测HBV基因突变情况,并对耐药相关基因突变及其意义进行分析.方法 采用巢式PCR法扩增93例慢性乙型肝炎患者血清HBV P基因反转录酶区,对PCR产物进行DNA测序,采用Bioedit6.0.5、SeqmanTM Ⅱ、EditSeq TM和Me-sAlign软件分析结果;同时随机抽取40份血清进行线性反向探针杂交,比较两者的检测结果,并对11个已知耐药相关突变位点进行分析.结果 在93份标本中DNA序列测定法检测到碱基突变113个,其中与LAM相关突变50份(53.78%),与ADV相关突变6份(6.46%),与LdT相关突变3份(3.23%),与ETV相关突变3份(3.23%);在40份血清中与线性反向探针杂交检测结果一致的突变为87.5%(35/40),氨基酸位点一致为98.0%(431/440).此外,还检测到V84I、$85C、A181S、1229W、N238T等与耐药相关的突变位点.结论 应用线性反向探针杂交检测虽然比较快捷,但其价格昂贵且只能检测已知常见的变异位点;建立在巢式PCR基础上的DNA序列测定法敏感性与线性反向探针杂交法相当,两者检测结果有较高的符合率,但似可检出更多的耐药相关突变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄长形	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	101	516	12.0	17.0
2	白雪帆	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	191	850	14.0	19.0
3	连建奇	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	63	330	10.0	15.0
4	王平忠	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	72	342	10.0	14.0
5	张野	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	48	152	7.0	10.0
6	姜丽丽	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	1	1	1.0	1.0