一串红SRAP—PCR体系的优化与品种鉴别

• 作者: 傅巧娟 崔海瑞 沈国正
• 来源期刊: 杭州农业与科技
• 学科: 农学
• 关键词: 一串红 SRAP 体系优化 品种鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 页码范围: 34-38
• 页数: 5页
• 分类号: S823

摘要

为建立一串红SRAP—PCR体系。对影响SRAP—PCR的退火温度、引物、dNTP、模板DNA、Taq酶等因素进行优化，并进一步对17个一串红品种进行了鉴定。确定了适宜的一串红SRAP—PCR反应体系，反应总体积25斗l，包括PCR缓冲液（含2．0mmol·L^-1MgCl2），模板DNA60ng，dNTP0．2mmol·L^-1，引物0．4IXmol·L^-1，Taq酶1U。反应程序为：94℃预变性5min后，按94℃变性45s、35℃复性60s、72℃延伸90s，进行5个循环；然后按94℃变性45s、50℃复性60s、72℃延伸90s，进行35个循环，最后72℃延伸10min。在此优化SRAP-PCR体系的基础上，采用24对引物组合对17个一串红品种进行了分析。其中有23对引物显示多态性，7个引物组合可在形态非常相近的两个品种神州红和帝王间显示多态性，只用F1／R1这个引物纽合就可以将17个品种完全区分开。本研究的结果为利用SRAP标记进行一串红品种鉴别、遗传多样性评价及标记辅助选择奠定了基础。