DNA损伤检查点蛋白调节子1片段的表达纯化及抗体制备

• 作者: 于芳 张勇 张鸿声 绳纪坡 胡宝成 高宁
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: DNA损伤检查点蛋白调节子1 表达 纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 601-604
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 4227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.05.001

摘要

目的:原核表达、纯化DNA损伤检查点蛋白调节子1(MDC1)片段,并制备其多克隆抗体.方法:设计特异引物,通过RT-PCR扩增编码MDC1 N端194个氨基酸残基的基因片段,测序正确后插入含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果:原核表达并纯化了MDC1 N端片段,并获得了抗MDC1的多克隆抗体,抗体效价达到1:12 800,Western印迹显示该抗血清能特异识别原核及真核细胞表达的MDC1.结论:MDC1 N端片段能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究MDC1在Fhit特异信号通路中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	绳纪坡	军事医学科学院生物工程研究所	18	50	4.0	6.0
2	于芳	军事医学科学院生物工程研究所	27	68	5.0	7.0
3	胡宝成	军事医学科学院生物工程研究所	35	154	5.0	11.0
4	张勇	军事医学科学院生物工程研究所	10	51	4.0	6.0
5	高宁	军事医学科学院生物工程研究所	25	56	3.0	6.0
6	张鸿声	军事医学科学院生物工程研究所	3	7	2.0	2.0