大鼠HSPB7蛋白的表达、活性研究及抗体制备

• 作者: 王竞 赵晓军
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克蛋白HSPB7 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 596-599
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33|R392.1
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆SD大鼠热休克蛋白HSPB7基因,通过原核表达、纯化获得HSPB7蛋白,对其活性进行初步研究,并制备其多克隆抗体,为进一步研究HSPB7蛋白奠定基础.方法 从SD大鼠心脏组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到HSPB7基因,亚克隆入pET-43.1a(+)载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,获得可溶性表达产物.经纯化、质谱鉴定后进行生物学活性研究,并用纯化蛋白免疫新西兰兔,分离血清,Western blot法测定抗体效价和特异性.结果 原核表达载体pET-43.1a-HSPB7成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量(Mr)约18 600的HSPB7蛋白,纯化蛋白经质谱鉴定正确.HSPB7具有分子伴侣活性,这种活性具有温度依赖性.用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔,制备的多克隆抗体效价达1:16 000,且具有较强免疫特异性.结论 得到具有生物学活性的大鼠HSPB7蛋白,成功制备了兔抗大鼠HSPB7蛋白的多克隆抗体,为后续研究提供了重要的实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王竞		18	125	6.0	11.0
2	赵晓军		36	75	4.0	5.0