适用于竹林土壤PCR-DGGE分析用的微生物总DNA提取及纯化方法

• 作者: 何沙娥 张智俊
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 微生物学 竹林土壤 微生物 DNA提取 聚合酶链反应-变性梯度胶电泳
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 页码范围: 164-168
• 页数: 5页
• 分类号: S718.4|Q936
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2009.02.003

摘要

为了获得完整、高纯度的竹林土壤微生物总DNA,采用改良的十二烷基硫酸钠-高盐抽提法对5种竹林土壤进行DNA提取,通过DNA凝胶回收试剂盒纯化粗提的DNA,利用细菌16 S rDNA基因的V3区引物对纯化的DNA进行了聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)验证.结果表明,该方法所需土壤样品少,抽提的DNA片段均在23kb以上,完整性好;采用DNA凝胶回收试剂盒纯化能够有效去除粗提DNA中大部分杂质,获得高质量的DNA;以此DNA为模板进行DGGE检测所反映的微生物信息量丰富.图3表1参15