携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体的构建及表达

• 作者: 徐开林 曹江 曾令宇 李振宇 潘秀英 陈翀
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒 Foxp3 调节性T细胞
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 199-202
• 页数: 4页
• 分类号: R392.4
• 字数: 3090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2009.02.004

摘要

目的 构建携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体,并研究其在CD4+CD25-T细胞中的表达.方法 构建含鼠Foxp3基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体.采用脂染法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,经共培养法感染免疫磁珠分离的小鼠CD4+CD25-T细胞,流式细胞术(FCM)检测基因转导效率,通过RT-PCR及Western Blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测Foxp3的表达.结果 成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-IRES-GFP/pXZ208-Foxp3-IRES-GFP,包装的重组慢病毒滴度达106 IU/mL.以pXZ208-IRES-GFP为阴性对照组,共培养法感染CD4+CD25-T细胞,实验组细胞基因转导效率达55.95%,并且存在Foxp3 mRNA和蛋白水平的高表达.结论 成功构建了携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体;该系统可有效的介导Foxp3基因在CD4+CD25-T细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘秀英	徐州医学院附属医院血液科	123	539	10.0	18.0
2	李振宇	徐州医学院附属医院血液科	88	507	11.0	18.0
3	徐开林	徐州医学院附属医院血液科	207	750	11.0	19.0
4	陈翀	徐州医学院附属医院血液科	44	149	5.0	10.0
5	曾令宇	徐州医学院附属医院血液科	81	270	7.0	11.0
6	曹江	徐州医学院附属医院血液科	31	131	5.0	10.0