小麦类CTR1基因的克隆和特性分析

• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: CTR1 RACE 胁迫 小麦 转基因烟草
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 3785-3794
• 页数: 10页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.11.004

摘要

[目的]克隆小麦类CTR1基因(TaCTR1),研究其在各种胁迫条件下的表达、亚细胞定位和过量表达TeCTR1对转基因烟草耐盐性的影响.[方法]利用RACE结合RT-PCR技术克隆TaCTR1,利用半定量RT-PCR研究TaCTR1在各种非胁迫及ABA处理条件下的表达,通过烟草转化研究过量表达TaCTR1对转基因植株耐盐性的影响.[结果]TaCTR1全长2 635 bp,编码759个氨基酸,在其羧基端有一个非常保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域,该结构域含有ATP结合位点和一个钙调素结合位点;TaCTR1与其它植物中CTR1的氨基酸序列同源性较高.TaCTR1的表达受NaCl和干旱胁迫的诱导,当用30 μmol·L~(-1) ABA对小麦幼苗进行处理时,TaCTR1的表达受到抑制,当将小麦幼苗转移至无ABA的Hoagland培养液时,TaCTR1的表达又逐渐升高.利用洋葱表皮细胞进行瞬时表达显示TaCTR1可能定位于细胞质膜.过量表达TaCTR1的转基因烟草植株耐盐性下降.[结论] TaCTR1是小麦中克隆的第一个CTR1基因,TaCTR1:GFP可能定位于细胞质膜,过量表达TaCTR1的烟草植株耐盐性下降说明TaCTR1是植物耐盐信号传导途径的负调控因子.