霍乱弧菌实时荧光PCR方法的建立

• 作者: 吴晓芳 徐德顺 沈月华
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌 TaqMan探针 荧光定量PCR CT基因
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-29,55
• 页数: 3页
• 分类号: R378.3
• 语种: 中文

摘要

目的:利用荧光定量PCR技术,建立霍乱弧菌快速敏感特异的检测方法.方法:以霍乱弧菌CT基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以霍乱弧菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg2+浓度,同时验证方法的特异性、敏感性和重复性.结果:本方法建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.6 μmol/L、0.6 μmol/L,Mg2+浓度为3.5 mmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与副溶性血性弧菌等7种相关细菌均无交叉反应.在纯菌条件下,检测灵敏度21 cfu/ml.稳定性分析表明,同一样品重复检测3次ct值的变异系数均小于5%.检测水源和海产品结果表明该方法较传统方法敏感、快速、简便.结论:建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,适用于水源、海产品和疫情暴发的霍乱弧菌快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈月华		10	7	1.0	2.0
2	吴晓芳		16	8	1.0	2.0
3	徐德顺		14	0	0.0	0.0