AIF基因真核表达载体的构建及其在MGC-803中的表达

• 作者: 吴本俨 李英男 王卫华 王昌正 黄海力
• 来源期刊: 中国肿瘤
• 学科: 生物学
• 关键词: 胃肿瘤 凋亡诱导因子 基因突变 基因表达 载体
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 564-567
• 页数: 4页
• 分类号: Q78:R735.2
• 语种: 中文

摘要

[目的]检测胃癌标本中AIF基因是否存在碱基突变;构建AIF基因真核表达载体AIF-GFP:并检测其在胃腺癌细胞株MGC-803中的表达.[方法]应用RT-PCR的方法分别从5例胃癌组织标本中提取总RNA,进一步扩增出全长的AIF基因;将其克隆到pMD19-T载体进行测序,并亚克隆至真核表达载体pEGFP-N2,重组载体AIF-GFP采用脂质体法瞬时转染MGC-803细胞.荧光显微镜观察AIF-GFP在细胞中的表达.[结果]由5例胃癌组织标本提取的mRNA所扩增出的AIF基因的序列与Gene Bank中AIF(AF100928)序列完全一致,胃癌组织中均末发现碱基突变;构建了真核表达载体AIF-GFP;并将其转染MGC-803进行表达.[结论]胃癌中AIF基因未发生碱基突变;AIF-GFP真核表达载体,在MGC-803细胞中获得了表达,为进一步探讨AIF在胃癌诊治中的应用奠定了基础.