OX40-IgG1融合基因重组表达载体的构建及鉴定

• 作者: 付苏 刘蓓 夏炜 易成刚 李立文 郝晓艳 郭树忠
• 来源期刊: 中国美容医学
• 学科: 生物学
• 关键词: OX40-IgG1 融合基因 真核表达栽体
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 960-963
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 4558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6455.2009.07.031

摘要

目的:构建含人OX40-IgG1融合基因的真核表达载体pDC315-0X40Ig,表达具有生物学活性的OX40Ig融合蛋白,为诱导异体复合组织移植免疫耐受的基因治疗作准备.方法:全基因合成目的基因OX40Ig,即人0X40胞外段序列及人IgG1 Fc段序列,将该片段插入到pUC57(+)载体后,亚克隆至真核表达载体pDC315(+),构建pDC315-0X40Ig重组质粒.构建的重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定后,用脂质体法转染于NIH/3T3细胞.以SDS-PAGE与Western Blotting检测细胞培养上清中OX40Ig融合蛋白的表达情况;MTT法观察OX40Ig对混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制作用.结果:合成的目的基因全长1320bp,构建的重组质粒经PCR,双酶切及测序鉴定正确.SDS-PAGE与Western Blotting证实OX40Ig融合蛋白在3T3细胞中实现表达,表达产物相对分子量为48000左右,与理论预期值相符.体外实验证实OX40Ig蛋白能够抑制异基因淋巴细胞的MLR.结论:成功构建了人OX40-IgG1融合基因真核表达载体pDC315-OX40Ig,体外实验证实表达的OX40Ig蛋白可抑制淋巴细胞增殖,为干预同种异体复合组织移植排斥反应奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭树忠	第四军医大学西京医院全军整形外科研究所	388	3242	24.0	35.0
2	易成刚	第四军医大学西京医院全军整形外科研究所	67	519	13.0	19.0
3	刘蓓	第四军医大学西京医院全军整形外科研究所	15	71	5.0	8.0
4	夏炜	第四军医大学西京医院全军整形外科研究所	83	683	13.0	22.0
5	郝晓艳	第四军医大学西京医院全军整形外科研究所	5	15	2.0	3.0
6	李立文	西北大学生命科学院	6	16	1.0	4.0
7	付苏	第四军医大学西京医院全军整形外科研究所	4	7	2.0	2.0