携抗菌肽PR39基因重组腺病毒的构建及抗胞内伤寒菌研究

• 作者: 文阳安 李朴 杨细媚 涂植光
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗菌肽 PR39 腺病毒载体 胞内菌 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 131-134
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2995字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.02.010

摘要

目的 构建抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体,观察其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌活性.方法 PCR扩增抗菌肽PR39成熟肽基因,插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,经PmeI线性化后与腺病毒骨架(pAdEasy-1)共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒载体(pAd-PR39).重组腺病毒载体经PacI线性化后转染293细胞,包装出重组腺病毒(Ad-PR39).利用重组腺病毒感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用RT-PCR和免疫细胞化学检测目的基因的表达,并对其抗菌活性进行初步检测.结果 先后构建了携抗菌肽PR39基因的穿梭载体和重组病毒载体,包装出重组腺病毒,并成功感染小鼠巨噬细胞RAW264.7.感染重组腺病毒的小鼠巨噬细胞RAW264.7能有效表达抗菌肽PR39.与对照(10.8±2.1 CFU/cell)相比,感染重组腺病毒的小鼠巨噬细胞RAW264.7具有更强的杀灭胞内伤寒菌的能力(7.2±1.8 CFU/cell). 结论 构建的重组腺病毒能够感染小鼠巨噬细胞RAW264.7并发挥抗菌作用,为抗菌肽PR39在胞内菌感染基因治疗中的应用奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	涂植光	重庆医科大学医学检验系	172	1533	19.0	32.0
2	文阳安	重庆医科大学附属第一医院检验科	20	63	5.0	6.0
3	李朴	重庆医科大学医学检验系	14	50	4.0	6.0
4	杨细媚	重庆医科大学医学检验系	1	6	1.0	1.0