重组枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化和性质研究

• 作者: 朱娟 朱苏文 程备久 范军
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 5-氨基酮戊酸脱水酶 枯草杆菌 组氨酸标签 酶学性质
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 156-160
• 页数: 5页
• 分类号: Q55
• 字数: 2729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2009.02.003

摘要

大肠杆菌中表达的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶(5-aminolevulinate dehydratase, ALAD),其N端含有组氨酸标签,Ni-NTA 一步纯化至均一.纯化的酶比活为3.6 U/mg蛋白,酶的最适pH为8.0～10.0,Km为0.95 mmol,Vmax为16.7 mmol/h,在55 ℃温浴10 min,酶活保留85 %,2 mmol/L的K+、Zn2+、Mg2+、Li+、Fe3+和Mn2+提高酶活,2 mmol/L的Co2+和Ca2+对酶活没有显著影响,2 mmol/L的Cu2+和1 mmol/L的Hg2+完全抑制酶活.在2 mmol/L的EDTA存在下酶活性丧失,表明酶催化依赖金属离子.100 mmol/L的酮戊酸抑制酶活约50 %.10 mmol/L的2-巯基乙醇时提高酶活3倍,而100 mmol/L的二硫苏糖醇几乎完全抑制酶活.氨基酸修饰表明赖氨酸和半胱氨酸残基可能是酶催化必需的,组氨酸和丝氨酸残基对酶催化不起关键作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范军	安徽农业大学生命科学院	25	187	6.0	13.0
2	朱苏文	安徽农业大学生命科学院	89	736	15.0	22.0
3	程备久	安徽农业大学生命科学院	111	852	16.0	23.0
4	朱娟	安徽农业大学生命科学院	4	15	3.0	3.0