三叶因子2相互作用蛋白基因在胃癌细胞cDNA文库中的筛选

• 作者: 任建林 周飞 潘金水 肖鸿敏 董菁 詹晓娟 许鸿志
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 解痉多肽 胃癌 相互作用蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（27）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2767-2772
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 5506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.27.003

摘要

目的:筛选并克隆人胃癌细胞eDNA文库中与三叶因子2(trefoil factor family 2,TFF2)蛋白相互作用的蛋白基因.方法:RT-PCR方法验证胃癌细胞存在TFF2mRNA表达:PCR法扩增TFF2基因,Not I与Sal I双酶切后定向克隆到酵母表达载体pDEST32,构建TFF2的诱饵质粒;Western blot验证TFF2诱饵质粒在酵母细胞中相应融合蛋白的表达:将诱饵质粒和人胃癌-cDNA文库猎物质粒共同转化MaV203酵母感受态细胞,通过营养缺陷型培养基(ura、His)与x-gal进行3重筛选阳性克隆,提取阳性克隆质粒测序,应用蛋白质数据库及生物信息学技术,对测序结果进行分析.结果:RT-PCR法证实胃癌细胞中存在TFF2mRNA表达;构建pDEST32-TFF2诱饵表达质粒成功:Western blot法证实诱饵质粒转化酵母细胞后正确表达TFF2-GAL4DBD融合蛋白:通过酵母双杂交筛选胃癌细胞cDNA文库,共获得35个表达His、Ura及x-gal报告基因的阳性克隆,其中测序成功为16个克隆,包含12个已知蛋白基因与4个未知功能基因.结论:从胃癌细胞cDNA文库中筛选出多种TFF2相互作用蛋白基因,其可能与胃癌的发生发展密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘金水	厦门大学附属中山医院消化内科	11	59	5.0	7.0
2	詹晓娟	厦门大学附属中山医院消化内科	1	1	1.0	1.0
3	许鸿志	厦门大学附属中山医院消化内科	6	11	2.0	3.0
4	董菁	厦门大学附属中山医院消化内科	11	22	3.0	4.0
5	周飞	厦门大学附属中山医院消化内科	17	21	2.0	3.0