表达H5N 1亚型禽流感病毒HA基因的重组鸭瘟病毒的构建

• 作者: 刘忠琛 单虎 吴美芹 孙强强 左青山 李明义 胡潇 马晶
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 鸭瘟病毒 TK基因 HA基因 重组鸭瘟病毒
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2009.04.020

摘要

利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需区的TK基因(约2.5kb),将其克隆入pUC19载体获得载体puDTK.根据已知载体pcDNA-LacZ的序列设计了一对引物,PCR扩增出pcDNA-LacZ上含CMV启动子、多克隆位点、SV40及LacZ的完整的基因表达盒插入puDTK的TK上,获得质粒puDTCL.根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列,设计引物从T-HA质粒上扩增出HA基因,克隆到puDTCL的表达盒的多克隆位点NheI与Apa I之间,成功构建含LacZ及HA基因的转移载体质粒puDTCL-HA.将这载体质粒与DPV34F2疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经蓝斑克隆筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的表达HA基因的重组鸭瘟病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎		183	631	12.0	17.0
2	马晶		6	16	3.0	3.0
3	李明义		25	135	7.0	10.0
4	胡潇		2	5	2.0	2.0
5	孙强强		2	2	1.0	1.0
6	左青山		3	18	2.0	3.0
7	吴美芹		2	2	1.0	1.0