表达H5N1亚型禽流感病毒HA和NA基因的重组鸭瘟病毒的构建

• 作者: 李明义 王明杰 胡潇 赵冬凤 高轩
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 鸭瘟病毒 TK基因 HA和NA基因 重组病毒
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 4019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2008.05.016

摘要

利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需的TK基因(约1.1kb),将其克隆入pGEM-T easy 载体获得体pGTK.根据已知的绿色荧光蛋白栽体pEGFP-C1的序列设计了一对引物,PCR扩增出pEGFP-C1上含CMV启动子、EGFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入pGTK的TK上,获得质粒pGTK-EGFP.根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因序列,设计了两对引物,分别从pT-HA和pT-NA两个质粒上扩增出HA和NA基因,克隆到pGTK-EGFP的表达盒的多克隆位点Kpn2 Ⅰ与Sma Ⅰ之间,构建含EGFP及HA和NA基因的转移质粒载体pGTK-EGFP-HA-NA.将这质粒载体与DPV34F2疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过荧光方法筛选,获得了表达HA和NA基因的重组DPv(rDPV-HA-NA).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高轩	河北农业大学动物科技学院	24	232	9.0	14.0
2	李明义		25	135	7.0	10.0
3	胡潇	河北农业大学动物科技学院	3	21	2.0	3.0
4	赵冬凤	河北农业大学动物科技学院	3	22	2.0	3.0
5	王明杰		1	14	1.0	1.0