桑天牛成虫肠道细菌基因组DNA的提取及PCR反应体系优化

• 作者: 侯晓杰 李会平 苏筱雨 袁秀洁 黄大庄 黄秋娴
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桑天牛 肠道细菌基因组DNA PCR反应体系 正交组合 单因素
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 379-383
• 页数: 5页
• 分类号: S888.72+9|Q939.121|Q503
• 字数: 4744字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2009.02.026

摘要

为了建立一套适用于桑天牛肠道细菌多样性研究的PCR反应体系和程序,采用改良的十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法提取桑天牛成虫肠道细菌基因组DNA,通过L16(45)正交组合试验和单因素梯度试验对MgCl2、dNTP、随机引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA的浓度和退火温度、循环次数等影响PCR扩增的重要因素进行优化.试验结果表明,采用改良的CTAB方法提取的桑天牛成虫肠道细菌DNA质量较高,适宜于PCR扩增分析.25μLPCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为:10×Buffer 2.5μL,MgCl22.0 mmol/L,dNTP0.2 mmol/L,随机引物0.48 μmol/L,Taq DNA聚合酶0.75 U,模板DNA 75 ng;退火温度60℃,循环次数30次.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李会平		65	696	16.0	24.0
2	黄大庄		176	1632	21.0	29.0
3	袁秀洁		4	20	3.0	4.0
4	黄秋娴		32	365	10.0	18.0
5	侯晓杰		12	217	7.0	12.0
6	苏筱雨		38	206	8.0	12.0