携带TGEV DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及安全性与免疫性分析

• 作者: 刘佳文 文心田 曹三杰 杨恒 黄小波
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 减毒沙门氏菌 DNA疫苗 安全性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.94
• 字数: 4957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2009.01.013

摘要

[目的]探讨以减毒沙门氏菌为载体,进行TGEV DNA疫苗口服免疫可行性.[方法]通过RT-PCR扩增TGEV四川株(SC-H)S基因5′端约2.1 kh的主要抗原位点片段,将其插入真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-S,体外转染COS-7细胞,间接免疫荧光检测S基因表达.通过电转化将pVAX-S转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建SL7207(pVAX-S)重组菌,并在体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,以RT-PCR、间接免疫荧光检测细胞内S基因的转录与表达情况.将SL7207(pVAX-S)重组菌以5×108、1×109、2×109 CFU剂量口服接种BALB/c小鼠,分析其安全性,并以1×109 CFU剂量的重组菌3次免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA检测免疫小鼠的血清:IgG与肠道粘膜IgA抗体.[结果]成功构建重组质粒pVAX-S,且重组质粒能在COS7细胞中表达.重组菌SL7207(pVAX-S)感染巨噬细胞后检测到目的基因的转录、表达.小鼠口服接种不同剂量重组菌,具有良好的安全性.免疫小鼠于二免后两周可检测到针对TGEV S蛋白的特异性血清IgG与肠道粘膜IgA抗体,且三免后两周与SL7207(pVAX1)空载体免疫组间分别存在显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01).[结论]携带TGEV DNA疫苗的减毒沙门氏菌小鼠试验显示了良好的免疫原性与安全性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨恒		2	32	2.0	2.0
2	刘佳文		1	17	1.0	1.0
3	曹三杰		2	32	2.0	2.0
4	黄小波		2	32	2.0	2.0