分泌型rIL-10基因在正常大鼠肝细胞系BRL中的稳定表达

• 作者: 张莉娟 王小众 郑伟达 陈治新 陈运新 黄月红
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素10 基因构建 基因表达 BRL细胞
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 118-121
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|R392.11
• 字数: 4151字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立稳定表达分泌型大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的正常大鼠肝细胞系(BRL细胞),为研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础.方法:通过RT-巢式PCR技术从大鼠外周血单核细胞(PBMC)中扩增出rIL-10全长基因,克隆入pcDNA3真核表达载体构建重组表达载体pcDNA3-rIL-10.鉴定正确后,用受体介导的脂质体转染试剂将pcDNA3-rIL-10转染BRL细胞,高浓度G418筛选,RT-PCR及ELISA法证实rIL-10在BRL细胞中的稳定表达.结果:构建的真核表达载体pcDNA3-rIL-10经质粒双酶切及测序鉴定证实载体构建的正确性.RT-PCR及ELISA法检测出经G418筛选的BRL细胞稳定表达IL-10.结论:成功构建分泌型pcDNA3-rIL-10真核表达质粒及筛选出稳定表达分泌型rIL-10的BRL细胞株,为进一步研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈治新	福建医科大学附属协和医院消化内科	83	438	11.0	15.0
2	王小众	福建医科大学附属协和医院消化内科	139	920	14.0	22.0
3	张莉娟	福建医科大学附属协和医院消化内科	38	220	10.0	13.0
4	郑伟达	福建医科大学附属协和医院消化内科	27	215	8.0	13.0
5	黄月红	福建医科大学附属协和医院消化内科	53	347	11.0	15.0
6	陈运新	福建医科大学附属协和医院消化内科	25	138	7.0	10.0