抗人BPI23单克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 万云霞 何秀娟 安云庆 李蕴 胡智颖 郭素娟 龙军
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 人BPI23 杂交瘤细胞 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1097-1101
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 2229字
• 语种: 中文

摘要

目的 采用杂交瘤技术制备抗人BPI23单克隆抗体,并对其应用进行初步分析.方法 免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按常规方法融合;用问接ELISA法和Western-blot筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株;阳性克隆用有限稀释法亚克隆3次获得稳定分泌抗人BPI23单克隆抗体的杂交瘤细胞株;扩增杂交瘤细胞注入小鼠腹腔后制备腹水;纯化腹水中的单抗并对抗体类型进行鉴定;用Western-blot分析抗体的特异性;用间接ELISA法测抗体效价;将分离纯化的正常人外周血中性粒细胞和单个核细胞制成涂片,用抗人BPI23单克隆抗体进行免疫染色.结果 获得3个(1B4、9C12:和2H11)稳定分泌抗人BPI23单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型分别为κ型IgM、κ型IgG1和κ型IgG1;抗体效价分别为1.28×105、1.28×105和4.1×106,纯化后抗体含量分别为0.208 g/L、2.03 g/L和3.88 g/L;3种纯化抗体均能与本实验制备的人BPI23和市售人BPI55标准品特异性结合,而不能与小鼠BPI25和人LBP结合;在免疫组化实验中,1B4、9C12:和2H11单抗均能与人中性粒细胞中的BPI特异性结合.结论 成功制备了人BPI23特异性单克隆抗体,为BPI检测试剂盒的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何秀娟	首都医科大学免疫学系	35	213	10.0	12.0
2	安云庆	首都医科大学免疫学系	50	269	9.0	15.0
3	龙军	首都医科大学免疫学系	17	72	6.0	8.0
4	李蕴	首都医科大学免疫学系	25	132	6.0	10.0
5	胡智颖	首都医科大学免疫学系	8	17	2.0	4.0
6	万云霞	中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所免疫室	4	6	2.0	2.0
7	郭素娟	中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所免疫室	1	2	1.0	1.0