沙门菌和志贺菌二重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 刘军义 汪文龙 盘宝进 罗兆飞 陈立标 韦梅良
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猴 沙门菌 志贺菌 二重聚合酶链式反应 检测
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 字数: 4091字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2009.05.005

摘要

根据GenBank提供的沙门菌invA基因序列和志贺菌ipaH基因序列设计引物,建立了二重PCR方法,在同一反应体系同时检测两种致病菌核酸,经二重PCR方法扩增后,在同一泳道同时检出沙门菌284 bp和志贺菌611 bp特异性扩增条带,而普通大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、阪畸大肠埃希菌、绿脓杆菌、蜡样芽胞杆菌、马链球菌、产单核细胞李斯特菌、鹅大肠埃希菌、猪水肿病大肠埃希菌均未出现这两种条带.对PCR产物进行测序,测序结果与已发表的基因核苷酸序列比较,沙门菌同源性为93%～100%,志贺菌同源性为98%～100%.应用建立的沙门菌和志贺菌二重PCR方法对广西6个试验猴养殖场1 665份猴粪便样品进行检测,检出沙门菌阳性25份,志贺菌阳性90份,阳性检出率分别为1.5%和5.4%.表明建立的沙门菌和志贺菌二重PCR检测方法特异性强、敏感性高,适用于临床粪便样品的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盘宝进	广西出入境检验检疫局技术中心	39	161	7.0	10.0
2	罗兆飞	广西出入境检验检疫局技术中心	23	146	6.0	11.0
3	刘军义	广西出入境检验检疫局技术中心	46	270	10.0	14.0
4	汪文龙	广西出入境检验检疫局技术中心	23	102	7.0	8.0
5	韦梅良	广西出入境检验检疫局技术中心	15	81	6.0	8.0