禽流感病毒H5HA、H7HA、H9HA亚型夹心ELISA方法的建立

• 作者: 徐一鸣 李昌 李霄 杨振国 王浩然 田明尧 金宁一 金扩世 鲁会军
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 血凝素 ELISA 检测
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 174-177
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4150字
• 语种: 中文

摘要

将禽流感病毒(AIV)H5、H7、H9血凝素亚型标准血清中的IgG作为包被抗体,H5、H7、H9血凝素亚型单克隆抗体作为第二抗体,建立了双抗体夹心ELISA(AC-ELISA)方法,并优化了反应条件.结果表明:单抗和标准血清最适工作质量浓度分别为5、10 mg/L,标准阳性血清于4℃包被12 h,二抗作用条件为37℃作用1 h,封闭条件为37℃作用1 h,酶标抗体工作条件为1∶5 000稀释后,37℃作用1 h,底物作用条件为37℃作用10 min.阴阳性抗原临界值为0.274～0.332.本方法具有很高的特异性和敏感性.