弓形虫半巢式PCR检测方法的建立

• 作者: 孔得翔 曲道峰 杜爱芳 王素华 蔡渭明
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪弓形虫病 P30基因 半巢式PCR 克隆
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 52-54,62
• 页数: 4页
• 分类号: S852.7|S855.99
• 字数: 2623字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序.结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%.该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg.该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜爱芳	浙江大学动物预防医学研究所	78	635	14.0	22.0
2	王素华		24	95	6.0	9.0
3	蔡渭明		3	35	3.0	3.0
4	曲道峰	浙江大学动物预防医学研究所	7	42	4.0	6.0
5	孔得翔	浙江大学动物预防医学研究所	3	26	2.0	3.0