AA肉鸡IFN-γ的表达及蛋白结构的初步预测

• 作者: 代丽 单安山 姜文博 孙进华 徐良梅
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肉鸡 Ⅱ型干扰素 蛋白 表达 蛋白质结构
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 74-79
• 页数: 6页
• 分类号: S54|S823
• 字数: 3832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2009.04.018

摘要

为了进一步研究肉鸡Ⅱ型干扰素(ChIFN-γ)蛋白的结构与功能,将新城疫Ⅳ系苗接种于9～11日龄SPF鸡胚尿囊腔中,诱生ChJFN-γ,提取脾脏总RNA,经过RT-PCR扩增出ChIFN-γ基因cDNA,测序后亚克隆至原核表达载体pPmEXTMHTb中,转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及westen Blot检测,利用DNAStar软件包中的Editseq将ChIFN-γ核苷酸序列翻译成氨基酸序列.然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,对蛋白的二级结构进行初步预测,利用自动比较蛋白同源建模的服务器Swiss-M0del对ChIFN-γ的氨基酸序列进行三级结构预测.结果显示,所克隆的ChIFN-γ序列大小为495 bp,与Digby和Lowenthal首次克隆的鸡Ⅱ型干扰素的同源性为99.8%.表达出预期大小(18 ku左右)的融合蛋白,可以与His单克隆抗体发生特异性反应,蛋白质结构预测表明,ChIFN-γ蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其解螺旋最低能量值为-14 245.698 kJ-mol-1.,有6个α螺旋结构.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单安山	东北农业大学动物科学技术学院	373	4210	32.0	45.0
2	徐良梅	东北农业大学动物科学技术学院	86	464	12.0	17.0
3	孙进华	东北农业大学动物科学技术学院	29	135	6.0	10.0
4	姜文博	东北农业大学动物科学技术学院	5	72	3.0	5.0
5	代丽	东北农业大学动物科学技术学院	4	16	3.0	4.0