猪IFN-α1基因的原核表达及其蛋白质结构的预测

• 作者: JING Zhi-zhong LUO Qi-hui MENG Xue-lian 房永祥 窦永喜 陈国华
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪IFN-α1基因 克隆 原核表达 结构预测
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 707-711
• 页数: 5页
• 分类号: Q511|Q786
• 字数: 4968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.013

摘要

利用RT-PCR技术,从被诱导的猪外周血单核细胞中克隆出了猪α1干扰素(IFN-α1)基因.序列分析表明,克隆的猪IFN-α1基因序列与GenBank上登录的猪IFN-α1基因的同源性为97.8%.用克隆的猪IFN-α1基因构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-IFN-α1.探讨了猪IFN-α1.基因表达的最佳条件,并在大肠杆菌中对此基因进行了表达.结果表明,IPTG的最佳诱导浓度为0.5 mmol/L,最适诱导温度为42℃,诱导9h表达量最大,表达产物约占菌体总蛋白的30%.SDS-PAGE分析表明,表达产物的分子质量为45 ku,且目的蛋白主要以包涵体的形式存在.经预测,猪IFN-α1蛋白为一结构松散的球状蛋白.