聚磷激酶基因在假单胞菌中的整合和表达

• 作者: 杜宏伟 杨柳燕 武俊 王晓琳 肖琳 蒋丽娟
• 来源期刊: 环境科学
• 学科: 地球科学
• 关键词: 聚磷 聚磷激酶(PPK) 三亲接合 恶臭假单胞菌
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 页码范围: 3011-3015
• 页数: 5页
• 分类号: X172
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0250-3301.2009.10.033

摘要

为了构建高效除磷的微生物,将来源于大肠杆菌的聚磷激酶基因(ppk)插入广宿主载体pBBR1MCS-2多克隆位点区,得到质粒pBBR1MCS-2-ppk.以该质粒为模板,通过PCR扩增出携带有载体启动子和终止子序列的ppk基因,插入自杀型质粒pUTmini-Tn5中得到重组质粒pUTmini-Tn5-ppk.pUTmini-Tn5-ppk经三亲接合作用进入Pseudomonas putida KT2440,同时mini-Tn5通过转座作用将pok整合到宿主菌株的染色体DNA中,获得基因工程菌Pseudomonas putida KT2440-PPK,用于表达ppk.RT-PCR结果显示,ppk基因在KT2440-PPK中得到较高量的表达,而在原始菌株KT2440中表达微弱.人工模拟污水实验结果表明,接种1 h时KT2440-PPK中聚磷含量达到最大,为3.05 mg/g,约是对照菌株KT2440的15倍.测定模拟污水中磷酸盐的含量表明,KT2440-PPK可以去除该模拟污水中90%以上的磷酸盐.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖琳	南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室	50	697	15.0	25.0
2	杨柳燕	南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室	69	1357	18.0	36.0
3	蒋丽娟	南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室	25	418	10.0	20.0
4	武俊	南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室	7	26	3.0	5.0
5	杜宏伟	南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室	2	14	1.0	2.0