SOD2启动子的克隆及转录活性的检测

• 作者: 刘芸 刘铮 姜勇 张秀娟 王娟 王达安
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 锰超氧化物歧化酶 启动子 基因,报告
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 965-969
• 页数: 5页
• 分类号: Q291
• 字数: 3749字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.05.027

摘要

目的:克隆小鼠锰超氧化物歧化酶基因(MnSOD, SOD2) 5'非编码区启动子序列,通过报告基因技术检测在静息或脂多糖(LPS)、亚砷酸钠(NaAsO2)等刺激下该段启动子的转录活性.方法:提取小鼠肝组织基因组DNA,PCR扩增小鼠SOD2启动子序列(-1 554～+48);采用基因重组技术构建由SOD2启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,将该载体瞬时转染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),荧光显微镜下观察静息或NaAsO2、LPS、佛波酯(PMA)刺激下红色荧光蛋白表达.结果:正确扩增出小鼠SOD2启动子(-1 554～+48)片段;成功构建其红色荧光蛋白报告基因载体,证实该质粒转染MEF细胞后静息状态下仅可见少量而微弱的红色荧光,经NaAsO2、LPS、PMA刺激后,红色荧光强度和亮度明显增加.结论:小鼠SOD2启动子(-1 554～+48)在静息状态下即具有转录活性,炎性、氧化应激刺激后SOD2表达增强;该启动子的成功克隆和其报告基因载体的构建,为研究SOD2的基因表达调控机制提供了重要基础和工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娟	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	28	123	6.0	10.0
2	张秀娟	广东医学院生理学教研室	10	34	3.0	5.0
3	刘铮	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	5	26	3.0	5.0
4	王达安	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	3	2	1.0	1.0
5	刘芸	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	19	38	4.0	5.0
6	姜勇	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	72	377	8.0	17.0