siRNA下调Smad3基因后对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶表达的影响

• 作者: 吴士良 孙斌 徐正荣 王泽荣 胡从莉
• 来源期刊: 苏州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: Smad3基因 siRNA 肝纤维化 转化牛长因子-β 多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 830-833,后插1
• 页数: 5页
• 分类号: R575.02
• 语种: 中文

摘要

目的 以Smad3基因为研究对象,筛选出该基因的有效siRNA干扰载体,并探讨下调表达Smad3基因对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAcTs)家族mRNA水平表达的影响.方法 将事先构建的3个带有荧光标记的干扰载体分别转染人肝星状细胞株(HSC)中,通过RT-PCR、Western blot方法分别从mRNA水平及蛋白水平检测干扰效率.并通过转染有效的Smad3基因的siRNA表达载体,检测下调Smad3以后对糖基转移酶ppGalNAcTs家族mRNA表达的影响情况.结果 成功筛选到Smad3基因的有效siRNA干扰载体,检测出转染了Smad3的siRNA表达载体的肝星状细胞中Smad3的mRNA和蛋白表达都受到了抑制,而糖基转移酶ppGalNAcTs的mRNA表达也随之发生了一些变化.结论 成功筛选到一个Smad3基因的siRNA 干扰载体,继而可转染人肝星状细胞,并抑制其中Smad3蛋白的表达,为研究siRNA方法在肝纤维化中的治疗作用提供了实验基础和理论支持.