桃果实磷脂酶Dα基因的电子克隆及序列分析

• 作者: 万嗣宝 尹京苑 张斌 战吉? 陈建业
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桃 磷脂酶Dα 电子克隆 RT-PCR Northern杂交
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 1705-1712
• 页数: 8页
• 分类号: S6
• 字数: 5111字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.05.025

摘要

[目的]克隆桃果实中的磷脂酶Dα基因,并对其进行序列分析和低温表达模式分析. [方法]采用电子克隆与RT-PCR相结合的方法分离桃果实PLDα基因cDNA全长序列;半定量RT-PCR和Northern杂交检测目的基因在桃果实低温贮藏过程中的表达情况.[结果]成功获得全长为2 859 bp的桃果实PLDα基因序列,该序列具有完整的开放阅读框架(ORF,172～2 604 bp),编码810个氨基酸.对ORF进行的RT-PCR验证结果与电子克隆序列一致.序列分析显示,桃果实FLDα基因编码的氨基酸序列与草莓、番茄、葡萄等物种的磷脂酶Dα氨基酸序列之间具有高度的保守性,含有N端C2结构域及两个保守的活性中心.半定量RT-PCR和Northern杂交分析显示,桃PLDα基因在低温贮藏过程中被诱导表达.[结论]本研究首次通过电子克隆的方法获得了桃果实PLDα基因的全长序列,揭示了其序列特征,并初步明确了其在桃低温贮藏期间的表达模式.结果证明基于EST数据库的电子克隆已经是获取植物新基因的有效途径,同时为更深入研究桃果实的耐冷性及低温贮藏方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹京苑	上海大学生命科学学院	75	760	17.0	24.0
2	张斌	上海大学生命科学学院	72	233	8.0	13.0
3	万嗣宝	上海大学生命科学学院	7	26	2.0	5.0
4	战吉?	中国农业大学食品科学与营养工程学院	1	10	1.0	1.0